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为大家讲述一些ELISA实验中的小技巧

      科研ELISA试剂盒实验看似简单,其实不然。记得以前一个同学*次做ELISA实验,跟我说,ELISA实验简直太简单了,到第2次在次做ELISA实验的时候,他惊讶了,说结果差别怎么这么大(同一份标本),第三次的时候,他决定认真的做一次,争取做到同一份标本,这次让他感受到ELISA并不是那么简单,发觉其实挺难的。今天的文章中为大家讲述一些ELISA实验中的小技巧,希望对大家有所帮助!

1.操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。

2.正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。

3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数,洗液在反应孑L内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流,造成孔问污染,导致假阴性或假阳性。

4.要保证加液量一致ELISA试剂盒我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一,判断错误。

5.显色液量不可过多加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,以免显色过强。

    ELISA试剂盒的影响因素应选用质量靠得住的产品,不能图便宜,忽视质量保证。试剂应妥善保存于4℃冰箱内,在使用时先平衡至室温,不同批号的试剂组分不宜交叉使用。试剂开启后要在一周内用完,剩余的试剂下次用时应先检查是否变质,显色剂如被污染变色将造成全部显色,导致错误结果。

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